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本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取组织和细胞的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

• 试剂盒拆封后，RNase A和蛋白酶K需放置-20℃保存。
  
• 使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签（每瓶需要单独加入45mL无水乙醇）。
  
• 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
  
• 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
  
• 如果试剂盒中的溶液出现沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影响效果。
  
• 洗脱缓冲液的体积最好不少于50μL，体积过小会影响回收效率：洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右（可用NaOH将水的pH值调至此范围），pH值低于7.0会降低洗脱效率。

• 样品的处理：
  
  • 细胞样本：取1×10⁶～1×10⁷个悬浮培养细胞，12000rpm离心1min收集细胞，贴壁细胞先用胰蛋白酶消化处理，再用预冷的PBS吹打成细胞悬液，然后12000rpm离心1min收集细胞，尽量除去上清，加200μL溶液A，振荡至彻底混匀。
    
  • 组织样本：组织量不宜过大，一般不要超过25mg，可以使用匀浆器匀浆，最好用液氮研磨成粉末状，再用预冷的PBS或无菌水充分悬浮，然后12000rpm离心1min收集细胞，尽量除去上清，加200μL溶液A，振荡至彻底混匀。
• 向悬浮液中加入2μL RNase A，55℃放置5min。
  
• 加入20μL的蛋白酶K，充分颠倒混匀，56℃水浴消化，细胞消化时间较短，组织消化时间较长，一般需要1～3个小时才能完成（鼠尾需要消化过夜）。消化期间可颠倒离心管混匀数次，直至样品消化完全为止。消化完全的指标是：液体清亮及粘稠。
  
• 加入200μL体积溶液B，充分颠倒混匀，如出现白色沉淀，可在75℃放置15～30min，沉淀即会消失，不影响后续实验。如溶液未变清亮，说明样品消化不彻底，可能导致提取的DNA量少及不纯，还有可能导致堵塞吸附柱。
  
• 加入200μL无水乙醇，充分振荡混匀15s，溶液变清亮。此时可能会出现絮状沉淀，不影响DNA的提取，将溶液和絮状物都加入吸附柱中。
  
• 12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
  
• 向吸附柱中加入600μL漂洗液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
  
• 重复步骤7。
  
• 12000rpm离心2min，将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
  
• 将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50～200μL经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置5min，12000rpm离心2min。
  
• 可将离心所得洗脱液再加入吸附柱中，12000rpm离心2min，即可得到高质量的基因组DNA。